產(chǎn)品說明

產(chǎn)品簡介：

一種具有凝膠染色特性，并可替換高毒性染色劑溴化乙錠(EB)的紅色熒光核酸染色劑。Gelred 與 EB 有著相同的光譜特性，可以在不改變?nèi)魏纬上裣到y(tǒng)的情況下用來替換 EB。本產(chǎn)品為 10000X in DMSO 為濃縮的 GelRed 溶液。用于前染時，可稀釋 10,000 倍后使用；用于后染時，建議稀釋 3300 倍后使用

操作步驟：

一、膠染法(前染法)(用法同 EB)

1．按常規(guī)操作，制備瓊脂糖凝膠，加入濃縮的 10000X Gelred，使其在凝膠中的終濃度為 1X Gelred(比 如，制備 100ml 凝膠，加入染料 5μl-10μl，可根據(jù)實際情況調(diào)整用量)，輕輕搖勻，倒膠。

2. 因為非常靈敏，電泳過程中 DNA marker 上樣量只需 1-2ul，而不是 EB 電泳中的 5ul，請嚴控 DNAmarker 上樣量。

3. 按常規(guī)方法電泳，觀測結果。

二、泡染法(后染法)

1.按照常規(guī)方法進行電泳。

2.用 dH2O 將 10000X Gelred 濃縮液稀釋約 3300 倍到 0.1M 的 NaCl 中，制成 3×染色液。（比如，將 15μl 10000× Gelred Plus 濃縮液和 5ml 1M NaCl 加到 45ml dH2O 中）。

3.將凝膠小心放入合適的容器中，緩慢加入足量的 3×染色液浸沒膠。室溫振蕩染色約 10-30min，最 佳染色時間根據(jù)凝膠厚度及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于 3.5-10%丙烯酰胺膠，染色時間通常介 于 30min 到 1 小時。然后觀測結果

附后染膠標準操作流程：

核酸電泳后染膠因為污染區(qū)域小，污染操作可控，越來越得到實驗室的接受和采用。

標準操作步驟（以配 100ml 1%的瓊脂糖為例）：

1、稱 1g 瓊脂糖，量取 100m l 1xTAE（或 1x TBE）電泳緩沖液， 依次倒入一個三角瓶中。

2、在微波爐中化膠煮沸致瓊脂糖完全融化。

3、取出靜置 5 分鐘，待膠液溫度降至 50 度，將膠液倒入制膠模上。

4、20 分鐘后待膠完全成型，取出放入電泳槽。

5、將 PCR 產(chǎn)物或者其他 DNA 樣品和上樣緩沖液混合，逐一上樣。

6、電泳 20-30 分鐘，根據(jù)溴酚藍位置判斷電泳到合適時間，停止電泳。

7、將跑完電泳的膠放入含有染料的液體中，染膠 10 分鐘（如果膠厚適度延長時間）。

8、取出膠，放入掃膠儀中觀察結果。

染膠液的配置：180ml dH2O 中加入 20ml 1M NaCl，再加入 10000× Gelred 濃縮液 60ul。

染膠液的使用：配置好的染膠液可以重復使用很多次，直至染膠強度很低再重新配置

產(chǎn)品特點：

1. 安全無毒： 獨特的油性大分子特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內(nèi)，艾姆斯氏試驗結果也表明該 染料的誘變性遠小于 EB。

2. 靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對核酸遷移的影響較小。樣品熒光信號強，背景信 號低。

3. 穩(wěn)定性高：適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定， 耐光性強。且不揮發(fā)。

4. 操作簡單：在預制膠和電泳過程中不降解，可直接用可見光凝膠透射儀觀察。

5. 適用范圍廣：可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法)；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰 胺凝膠電泳；可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

特點： 性價比高，品質(zhì)優(yōu)越

適用范圍：

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